如何讀懂PGD技術(shù)，了解試管嬰兒操作過程中zui為關(guān)鍵的一步，不再只是臨床醫(yī)師們的必修課，也成為許多希望成為父母的夫妻亟待解決的問題。

　　隨著多種生物學(xué)工具的飛速發(fā)展，胚胎植入前遺傳學(xué)診斷(Preimplantation Genetic Diagnosis,PGD)可以說迎來了一個新時代，同時由于現(xiàn)代社會接近11%的不孕不育比率，PGD的需求也越來越多，如何讀懂這一輔助生育技術(shù)，了解試管嬰兒操作過程中zui為關(guān)鍵的一步，不再只是臨床醫(yī)師們的必修課，也成為許多希望成為父母的夫妻亟待解決的問題。

　　PGD，PGS，PGH有何區(qū)別?

　　胚胎植入前遺傳學(xué)診斷(PGD)是一種通過在配子或早期胚胎階段對遺傳病進行分子遺傳學(xué)的診斷方法，胚胎植入前遺傳學(xué)篩查(PGS)則是指在試管嬰兒胚胎移植之前，檢測早期胚胎23對染色體全面的遺傳信息，選擇正常胚胎植入。前者是尋找特定染色體上的已知單基因疾病，后者是以提高妊娠率活產(chǎn)率為目的的早期產(chǎn)前篩查方法，通過對染色體數(shù)目異常的篩選，選擇染色體核型正常的胚胎進行移植，可以說PGS是一種低危險度的PGD。

　　此外還有PGH，這是植入前遺傳學(xué)單倍型分析(preimplantation genetic haplotyping)，就是選擇與致病基因在染色體的位置上緊密連鎖的STR標(biāo)記鑒別胚胎是否遺傳了有致病基因的染色體來進行診斷。其特點在于使用了 DNA 指紋印記分析來進行遺傳診斷 , 而不再僅僅是鑒別某些具體的遺傳標(biāo)記 。

　　哪些情況需要進行PGD?

　　在體外受精過程中，醫(yī)生通過激素來刺激女性的卵巢。卵巢產(chǎn)生多個卵子，隨后可由生殖科專家人工提取。在實驗室中，專家利用伴侶或供體的精子讓女性的卵子受精，創(chuàng)造出胚胎。但如何挑選出健康具有活力的胚胎進行植入并不容易，這需要對胚胎的遺傳物質(zhì)進行研究來檢測胚胎是否有某些基因的改變。

　　當(dāng)一對夫婦知道一方或雙方是遺傳病的攜帶者，或家族中的某個人患有遺傳病，或他們已經(jīng)有了一個患病的孩子時，就可以在進行體外受精結(jié)合胚胎移植技術(shù)時使用這種技術(shù)。這與傳統(tǒng)產(chǎn)前診斷如超聲、羊水穿刺等先懷孕后診斷的方法不同，是在胚胎期即接受檢測和篩選，即先診斷后懷孕。

　　目前PGD的應(yīng)用主要集中在十種單基因性疾病，包括常染色體隱性遺傳性疾病，如地中海貧血、囊性纖維化、脊肌萎縮癥、鐮刀型紅細(xì)胞貧血，常染色體顯性遺傳性疾病，如亨廷頓病、強直性肌營養(yǎng)不良癥和腓骨肌萎縮癥，性連鎖性疾病包括脆性X染色體綜合征、進行性肌營養(yǎng)不良和血友病等。

　　另外PGS則適用于高齡(>35歲)、既往非整倍體妊娠、反復(fù)體外受精(IVF)失敗、反復(fù)流產(chǎn)、嚴(yán)重的男性不育等因素導(dǎo)致的不孕不育。

　　與非PGD試管嬰兒的區(qū)別?

　　經(jīng)典的*代試管嬰兒用穿刺針將卵子取出后在體外與精子結(jié)合，將受精后的胚胎移植到宮腔，避開了生理情況下精子與卵子在輸卵管結(jié)合的過程，因此主要用于輸卵管堵塞病例;第二代試管嬰兒則針對男性少、弱、畸精子癥患者，這些患者精子質(zhì)量較差，往往很難自己鉆進卵子完成受精過程，醫(yī)師們用一根顯微穿刺針，將精子注射入卵子幫助其受精。PGD輔助生育技術(shù)是第三代試管嬰兒，它在試管嬰兒中加入了診斷步驟。

　　這里指出的從*代到第三代試管嬰兒技術(shù)，它們的區(qū)別主要在于所適用的情況不同 , 而并不是療效上的差異。

　　PGD流程?

　　PGD技術(shù)主要包括兩個操作步驟：活體組織檢查和遺傳診斷 ?；铙w組織檢查是指在胚胎的極體期、卵裂期或囊泡期，通過機械 、 化學(xué)或激光方法打開卵透明帶, 通過擠壓或抽吸技術(shù)取出一個( 或多個) 細(xì)胞待檢查 。第二是遺傳診斷，也就是利用PCR或者FISH等技術(shù)分析單遺傳疾病，染色體異常等。

　　*個步驟一般分為3個主要實施途徑，包括卵子的*和第二極體活檢、卵裂期胚胎的卵裂球活檢以及囊胚活檢。這幾種活檢都有其優(yōu)缺點:盡管在卵裂期胚胎中存在高嵌合率，以致于卵裂球活檢存在局限性，但其仍被廣泛應(yīng)用。取1個或是2個卵裂球用于PGD和PGS存有爭議，盡管2個卵裂球可提高診斷的準(zhǔn)確性，但是可能會降低胚胎的植入潛能或者存活率，因PGS的目的是提高著床率，所以目前多取1個卵裂球用于活檢，迄今只有一項研究對比了取1個和2個卵裂球活檢的差異，但差異并無統(tǒng)計學(xué)意義。

　　作為卵子成熟與受精過程的自然排泄物，*、二極體的活檢不會影響胚胎的發(fā)育，極體活檢的zui大*性是不減少胚胎的遺傳物質(zhì)和可供診斷的時間相對較長。但是極體活檢不能提供任何有關(guān)父方來源的染色體異?；蝻@性單基因疾病的信息。

　　隨著更多的生殖中心可成功地將胚胎序貫式培養(yǎng)至囊胚階段，囊胚活檢的應(yīng)用逐漸增多。IVF相關(guān)技術(shù)的提升使得囊胚活檢可行。延長培養(yǎng)時間可獲得較卵裂期胚胎具有更好發(fā)育潛能的胚胎，以區(qū)分發(fā)育潛能稍差的胚胎。囊胚移植能夠淘汰在配子基因組激活之后由于基因或代謝缺陷發(fā)育受影響的胚胎。囊胚活檢可供診斷的時間為24 h，相對卵裂球活檢可供診斷的48-60 h明顯縮短，但是玻璃化冷凍胚胎技術(shù)的應(yīng)用解決了這一難題，且有研究報道解凍后胚胎存活率較高。

　　需要多長時間?

　　之前PGD通過形態(tài)學(xué)分析和特定疾病位點附近的短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)的遺傳來進行，這需要漫長的等待，每個STR標(biāo)記的檢查和驗證通常需要3至6個月。

　　現(xiàn)在利用核型定位來進行單基因疾病的PGD，不需要開發(fā)疾病或患者特異的檢測，因此大大縮短了所需的時間。一般周轉(zhuǎn)時間不到一周。

　　PGD成功率是多少?

　　一般來說，PGD試管嬰兒的成功率不如*代和第二代試管嬰兒，但這主要是因為PGD針對的對象往往是遺傳病、反復(fù)自然流產(chǎn)、平衡易位、少弱精子癥等患者，通常年齡偏大，獲得胚胎數(shù)量較少，再經(jīng)過PGD篩選后，可供移植的胚胎數(shù)更少。不過經(jīng)過胚胎篩選后，孕婦的流產(chǎn)率會比普通試管嬰兒要低，出生缺陷率明顯下降。

　　PGD會出現(xiàn)誤診嗎?

　　會，由于活檢材料的代表性不足、分析技術(shù)缺陷造成誤診。迄今為止，已經(jīng)出現(xiàn)了囊性纖維化，強直性肌萎縮和地中海貧血等的誤診。歐洲PGD協(xié)作組報道單基因性疾病PGD的誤診率僅0.47%，而染色體病PGD的準(zhǔn)確率普遍報道在95%左右。

　　PGD后代會出現(xiàn)健康問題嗎?

　　PGD技術(shù)需從胚胎上取走一個細(xì)胞，這一過程是否影響胚胎的正常發(fā)育一直是各國科學(xué)家所關(guān)心的問題。

　　2010年，比利時布魯塞爾Ziekenhuis大學(xué)生殖中心報道了對1992年到2005誕生的581名經(jīng)卵裂球活檢的子代隊列研究，其孕周出生體重與2889名經(jīng)單精子顯微注射(intracytoplasmicsperminjection，ICSI) 的子代沒有顯著差異，嚴(yán)重畸形的比例在PGD和ICSI分別為2.13%和3.38%，也沒有顯著差異 因此，該研究認(rèn)為胚胎活檢不會增加單胎的風(fēng)險，但圍產(chǎn)期多胎妊娠的死亡率較高值得進一步關(guān)注。

　　PGD子代流行病學(xué)調(diào)查研究的年齡一般是在出生后2年到5年 因此，PGD是否對成年子代有影響還缺乏資料。2009年南京醫(yī)科大學(xué)和中科院合作研究了在小鼠胚胎進行活檢后妊娠的子代在成年后的發(fā)育情況，結(jié)果表明體外活檢操作可能引起PGD后代成年小鼠神經(jīng)退行性改變的高風(fēng)險性。

　　盡管該研究從蛋白組學(xué)的角度認(rèn)為PGD對成年子代有影響，但由于這一研究采用的是小鼠，而且研究活檢的胚胎是在4細(xì)胞期，活檢細(xì)胞占胚胎細(xì)胞的比例是1/4，而人類胚胎活檢一般在8細(xì)胞期，活檢細(xì)胞的比例是1/8，因此能否說明人類PGD子代的神經(jīng)系統(tǒng)高風(fēng)險還需進一步研究。

　　不過相對于出現(xiàn)的遺傳疾病，PGD輔助生殖技術(shù)在新技術(shù)的發(fā)展下也會逐漸越來越準(zhǔn)確，目前的流行病學(xué)調(diào)查資料顯示這一技術(shù)并不會增加胎兒畸形的發(fā)生率，但依然需要嚴(yán)格監(jiān)控。